猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）种毒的特性研究与制备

猪传染性胃肠炎（TGE）是由猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起的一种高度传染性猪病。TGEV是冠状病毒属成员之一，该病毒感染可导致仔猪严重腹泻，死亡率极高，是危害养猪业的重要病毒。免疫接种是预防TGEV感染的有效手段，TGEV疫苗开发对防治TGEV感染具有重要的价值。而制备纯净的种毒是疫苗株的基础。在本研究中，我们在以往实验基础上根据兽用生物制品注册分类及注册资料要求，对实验室保存的TGEV HR/DN1毒株进行连续传代培养，传代培养数十代后，病毒滴度已经基本上稳定在106.0-107.0/0.1mL。进一步我们还对种毒进行了一系列理化特性试验:1.通过核酸类型试验、脂溶剂敏感性试验证实该种毒为有囊膜的RNA病毒；2.pH3.0酸性实验证实该病毒在低温条件下比较稳定，高温则发生灭活；3.热敏感实验说明TGEV并不耐热，在50℃条件以下较为稳定，但随着温度的升高病毒滴度也会有所下降。用间接免疫荧光、RT-PCR等技术对病毒进行鉴定。最后参照《中国兽药典》对种毒和细胞分别进行纯净试验即细菌、霉菌、支原体以及外源病毒污染检测，证明细胞和种毒均无污染。以上实验结果表明该病毒具有繁殖滴度高、传代稳定、病毒纯净等特点，符合种毒制备的基本条件。建立原始种子批、基础种子批，大量繁毒后，按要求分装，建立工作毒种库，为下一步进行猪体实验和疫苗开发奠定了基础。